排阻色譜又稱凝膠色譜或凝膠滲透色譜,是利用被分離物質(zhì)分子量大小的不同和在填料上滲透程度的不同,以使組分分離。常用的填料有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等,可根據(jù)載體和試樣的性質(zhì),選用水或有機溶劑為流動相。
離子排阻色譜分離測定的是低電離度的分子而不是離子,分離在離子交換柱上實現(xiàn)。它的理論基礎(chǔ)是說明離子通過膜擴散的Donna平衡,其主要論點是離子交換劑上大體積不擴散離子可排斥同電荷小離子擴散進入該相。
由于Donnan電勢的存在,強酸陰離子受阻于陽離子交換樹脂之外,而低電離度弱酸分子能夠進入到樹脂內(nèi)部,且通過溶質(zhì)與樹脂功能團之間的極性相互作用和溶質(zhì)與樹脂基體間的非極性相互作用為固定相所保留。因此,在離子排阻色譜中溶質(zhì)保留的選擇性產(chǎn)生于:
1、溶質(zhì)受阻程度的不同;
2、溶質(zhì)與樹脂功能團間極性相互作用的差別;
3、溶質(zhì)與樹脂基體間非極性相互作用的差別。
離子排阻色譜與離子交換色譜在裝置上沒有什么區(qū)別。固定相是通常的磺化S—DVB陽離子交換樹脂。樹脂中二乙烯基苯的含量影響弱酸的保留,一般而言,交聯(lián)度越低,就有越多的電解質(zhì)進入到樹脂內(nèi)部,使弱酸的保留增強。