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　　在為顯微鏡選擇數(shù)碼相機時，應考慮兼容性.耦合器放大率.為了保證配對成功，像素大小和分辨率等因素。

　　一.相機與顯微鏡兼容

　　確保相機傳感器的尺寸與顯微鏡的物鏡兼容。顯微鏡由多個透鏡組件組成，多個透鏡組件將樣本的光波聚焦在傳感器上，以產生圖像。物鏡允許顯微鏡提供放大的真實圖像。見的物鏡放大范圍是4倍.10倍.40倍至100倍。

　　大多數(shù)顯微鏡是圓形的，而相機傳感器通常是矩形的。因此，如果相機傳感器傳感器的尺寸太大，物鏡只會將光源聚焦在相機傳感器的一個小圓上，導致逐漸光暈。漸變光暈是顯微鏡光路光學邊緣的再現(xiàn)，在圖像上顯示為暗邊。

　　整個相機傳感器需要被照亮，以防止逐漸暈眩，視線——這意味著相機傳感器的尺寸必須等于或低于顯微鏡物鏡。

　　二.選擇耦合器

　　耦合器用于相機的視場范圍，而不改變圖像質量(FOV)。選擇耦合器的黃金法則是:耦合器上的放大率越大，獲得的FOV相反，耦合器上的放大率越小，F(xiàn)OV越大。如果放大率過低，可能會導致逐漸暈倒，如果放大率過高，可能會導致圖像丟失。

　　以下是為不同傳感器芯片選擇相關耦合器放大率的快速指南。

　　傳感器尺寸

　　耦合器放大率

　　1/3”

　　0.35X

　　1/2”

　　0.5X

　　2/3”

　　0.66X

　　1”

　　1X

　　三.像素大小

　　在為應用程序選擇數(shù)碼相機時，像素大小是最重要的因素之一。如何確定正確的像素大小?

　　1.確定顯微鏡的光學分辨率。

　　可以用來確定顯微鏡的分辨率Ernt-Abbe的橫著(即XY)分辨率透射公式：d=λ/2NA，其中：

　　λ=用于標本成像的光波長

　　d=光學分辨率(條紋間距)

　　NA=物鏡的數(shù)值孔徑

　　比如，使用550nm的白光.NA4倍物鏡為0.20，光學分辨率(理論)極限達到d=550nm/(2X0.20)=1375nm

　　2.計算采樣頻率。

　　根據(jù)以下公式，采用奈奎斯特采樣定理計算采樣頻率fs。奈奎斯特定律指出，為了恢復連續(xù)信號的特征，離散取樣的次數(shù)應該是連續(xù)信號頻率的兩倍。因此，所需的芯片取樣頻率fs應小于或等于條紋間距d的一半。

　　取樣頻率fs=d/2

　　以上示例：采樣頻率為1375/2=687.5nm

　　3.計算所需的像素大小。

　　相機所需的像素大小=取樣頻率fs*放大倍數(shù)

　　這里需要注意的是，放大率有幾個來源:物鏡:.管鏡及相機支架/耦合器。要獲得總放大倍數(shù)，需要將所有邊緣的源乘積。

　　所以：所需的像素大小=fs(687.5nm)X物鏡放大率(4)X(1)X相機支架放大倍數(shù)(1)=687.5nmX4X1X1/1000=2.75µm

　　四.選擇相機的分辨率

　　例如，相機的分辨率是指相機傳感器上的像素數(shù)：2MP(200萬像素).4MP(400萬像素)等。一般來說，分辨率越高，圖像傳感器的像素越低。然而，顯微鏡的光學局限性表明，較高的像素或較小的像素間距并不總是提供較高的分辨率。另一方面，較大的像素收集更多的光源，這對相機的靈敏度起著重要作用。因此，需要在分辨率和靈敏度之間進行測量。選擇和數(shù)值孔徑是獲得更好分辨率的關鍵(NA).下表顯示了與光學系統(tǒng)總放大率和樣本頻率相關的中等像素間距。如果選擇兩個相同的傳感器尺寸，選擇較小的像素。

　　物鏡/數(shù)值孔徑

　　分辨率極限(µm)

　　所需的像素大小(µm)

　　4X(0.20)

　　1.5

　　2.9

　　10X(0.40)

　　0.64

　　3.2

　　20X(0.75)

　　0.39

　　3.9

　　40X(1.30)

　　0.22

　　4.5

　　Pixelinkvision配合相機配免費Pixelink圖像Capture與第三方圖像采集軟件(如WinRoot2018.LabVIEW.NIMAX.MATLAB和Halcon)兼容。