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色譜法也叫層析法，它是一種高效能的物理分離技術(shù)，將它用于分析化學(xué)并配合適當(dāng)?shù)臋z測手段，就成為色譜分析法。

判斷故障與故障排除的原則：1.確認(rèn)問題至少發(fā)生兩次以上。如果問題不重復(fù)出現(xiàn)，很難證實其確實是問題；2.從的因素入手；3.一次只變化一個因素，以使你能夠確認(rèn)所變因素與問題之間的關(guān)聯(lián)；4.恢復(fù)原狀。如果使用更換組件方法來查找問題之所在,完畢后應(yīng)將原有完好組件安裝回原處；5.養(yǎng)成記錄的好習(xí)慣。一個完整的好記錄是成功地進(jìn)行故障排除的原則。

色譜系統(tǒng)的反壓，流動相流經(jīng)管路及色譜柱時會有阻力,即，所謂的反壓, 又稱，系統(tǒng)壓力。Waters習(xí)慣用的壓力單位是Psi(磅/平方英吋)，其它單位有：Bar，Mpa（1Bar=0.1Mpa=14.5Psi）。影響色譜系統(tǒng)反壓的因素：流動相的粘度是產(chǎn)生反壓的主要原因,粘度越大,反壓越高；流速對反壓的影響是線性關(guān)系,流速越大,反壓越高；溫度對反壓的影響是反比關(guān)系,溫度升高,反壓降低；反壓與色譜柱長度成正比；反壓與填料顆粒度的平方成反比；3.5μm填料比5μm填料反壓高；反壓與管路直徑的四次方成反比(1/D4)；反壓與管路的長度成正比。

HPLC系統(tǒng)壓力問題分析：1.系統(tǒng)壓力高，可能的原因：溫度太低；流速太高；流動相粘度大；管路堵塞；儀器或色譜柱堵塞；壓力傳感器問題。2. 壓力低或沒有壓力，可能的原因：溫度太高;流速太低；泵關(guān)閉或保險絲斷了；泵未輸送流動相；系統(tǒng)內(nèi)有滲漏處；所用溶劑不正確；自動進(jìn)樣器在Purge時卡住。3.壓力不穩(wěn)，可能的原因：壓力傳感器問題；泵排氣不充分；泵失效；流動相未正確脫氣；所用溶劑不混溶或易揮發(fā)。

---本文摘自實驗與分析