PCR儀也稱為熱循環(huán)儀,是一種DNA放大器,通過聚合酶鏈式反應調(diào)節(jié)溫度,并擴增DNA片段。有時也用于促進酶消化或快速診斷的反應。將保持反應混合物的管插入PCR儀內(nèi)的熱塊中,機器以不連續(xù)的步驟升高和降低塊的溫度。PCR儀器通常循環(huán)4到99攝氏度,一些PCR儀器包含多個熱塊,可以同時進行多個PCR反應,以下將介紹PCR的目的,代表,循環(huán)及步驟。
1、PCR的目的
PCR的目的是擴增少量感興趣的DNA序列,以便可以單獨分析,PCR可用于制備大量特定的DNA片段或測試DNA樣品序列。當需要制備大量單個基因時,例如用于基因工程或克隆,PCR用于研究,還用于測試樣品中是否存在特定的基因產(chǎn)物。在法醫(yī)學中,PCR技術用于進行DNA指紋分析,以分析現(xiàn)場的DNA證據(jù),還可以用于醫(yī)療環(huán)境中以進行的組織分型。
2、PCR代表什么
生物學中的PCR代表聚合酶鏈反應,它指的是增加或放大少量DNA,以進行更精確數(shù)據(jù)分析的過程。聚合酶鏈反應具有幾個優(yōu)點,一個是它便宜,這種DNA擴增過程可以在短時間內(nèi)完成,非常適合正在緊急時間線工作的研究人員。PCR可以早期診斷惡性疾病,例如白血病和淋巴瘤。與聚合酶鏈反應相關的一些缺點包括易于出錯和可能突變?yōu)槟0錎NA。
3、什么是PCR循環(huán)
聚合酶鏈反應循環(huán)是三步過程,包括變性,退火和延伸。該循環(huán)用于從DNA拷貝擴增特定基因,它被用于法醫(yī)學中以隔離現(xiàn)場的血液,以確定期間是否存在。循環(huán)的步是變性,加熱并分離DNA鏈。第二步是退火,用于將引物和聚合酶連接到DNA鏈上,第三步是伸長,在每個引物后不斷添加堿基以合成新的DNA鏈。該循環(huán)中的步驟重復多達35次,以產(chǎn)生大量DNA樣品。盡管在變性之前存在初始化步驟,并且在伸長之后存在伸長步驟,但是在循環(huán)期間不重復這些步驟。
4、PCR的步驟
聚合酶鏈式反應由三個步驟組成,DNA變性,引物退火和延伸。這些步驟重復20至35次,以合成正確數(shù)量的目標DNA,這些步驟中的每一步都需要不同的溫度范圍,這允許PCR機器控制步驟,PCR通常在含有用于DNA合成的小PCR反應管中進行。
文章來源:上海靳瀾儀器制造有限公司/pcr/index.html